產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0007 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 腎;自發(fā)永生;雄性 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 牛 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 牛腎細胞直銷
簡稱:MDBK(NBL-1)
種屬:牛
來源:腎;自發(fā)永生;雄性
培養(yǎng)基:EMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0007
使用方法:
收到細胞牛腎細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Palmitone 502-73-8 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠雄激素(androgen)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Oxytetracycline 2058-46-0 中文名:鹽酸土霉素 分子式:C22H25ClN2O9 度:98.0% 小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Oxymetholone 434-07-1 中文名:康復(fù)龍 分子式:C21H32O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Oxiracetam 62613-82-5 中文名:奧拉西坦 分子式:C6H10N2O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(mouse TARC) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Oxandrolone 53-39-4 中文名:氧甲氫龍 分子式:C19H30O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(mouse TAT) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
小鼠三0酸腺苷(ATP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Horminone 中文名:7α-羥基羅列酮 分子式:C20H28O4
小鼠軟骨糖蛋白39(mouse YKL-40) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Methylprednisolone 83-43-2 中文名:甲基潑尼松龍 分子式:C22H30O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠乳鐵傳遞蛋白elisa試劑盒 小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒、小鼠乳鐵傳遞蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Glycoursodeoxycholic acid 64480-66-6 中文名:甘氨熊脫氧膽酸 分子式:C26H43NO5 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 膽烷; 對照品; 標準品; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Brinzolamide 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3
小鼠乳酸脫氫酶elisa試劑盒 小鼠乳酸脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠乳酸脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠乳酸脫氫酶試劑盒、小鼠乳酸脫氫酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Glycoursodeoxycholic acid 中文名:甘氨熊脫氧膽酸 分子式:C26H43NO5
1,2,3-Triacetyl-5-deoxy-D-ribose 62211-93-2 中文名: 分子式:C11H16O7 RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit 兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Sertaconazole 99592-32-2 中文名:舍他康唑 分子式:C20H15Cl3N2OS CLIAKitforBeta-DFELISAKit大鼠β-防御素規(guī)格:48T/96T
Doxapram monohydrate 7081-53-0 中文名:鹽酸多沙普侖 分子式:C24H33ClN2O3 細菌樣品二維電泳裂解液用于細菌蛋白二維電泳
Quinestrol 152-43-2 中文名:炔雌醇環(huán)戊醚 分子式:C25H32O2 RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tetracaine 94-24-6 中文名:丁卡因 分子式:C15H24N2O2 豚鼠白介素2(IL2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL2 ELISA Kit
牛腎細胞直銷病毒(PTGV)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T Sitostenone 1058-61-3 中文名:豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O 度:96.0% 關(guān)鍵詞: 蘇里南苦木; 火炬松; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
臭氧快速試劑盒 Ozone rapid reage kit 4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl 中文名: 分子式:C16H18FN3O3S 度:98.0%
橙 1g Prerubialatin 1667718-89-9 中文名: 分子式:C27H20O7 度:% 關(guān)鍵詞:
程序性死亡因子1 英文名稱: programmed death 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PD1 Periplocin 13137-64-9 中文名:杠柳毒苷 分子式:C36H56O13 度:98.5% 關(guān)鍵詞:
成纖維細胞生長因子23 英文名稱: Human Fibroblast Growth Factor 23 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FGF-23 4-Acetamidophenol 103-90-2 中文名:對乙酰氨基酚 分子式:C8H9NO2