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使用方法：
收到細(xì)胞非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：COS-1

種屬：非洲綠猴

來(lái)源：腎；SV40轉(zhuǎn)化；雄性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0001

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Miconazole nitrate  22832-87-7  中文名：硝酸咪康唑  分子式：C18H15Cl4N3O4  度：98.0%      小鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Metronidazole  443-48-1  中文名：甲硝唑  分子式：C6H9N3O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Metoclopramide  364-62-5  中文名：甲氧氯普胺  分子式：C14H22ClN3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胃標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Methyltestosterone  58-18-4  中文名：甲基睪酮  分子式：C20H30O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Methylprednisolone hemisuccinate  2921-57-5  中文名：  分子式：C26H34O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠維生素D結(jié)合蛋白   英文名稱：   Mouse Vitamin D Binding protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DBP
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Clorofene  中文名：4-氯-2-芐基苯酚  分子式：C13H11ClO  度：98.0%

小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Fudosteine  中文名：福多斯坦  分子式：C6H13NO3S  度：98.0%

小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Clotrimazole  23593-75-1  中文名：克霉唑  分子式：C22H17ClN2 

小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Fudosteine  中文名：福多斯坦  分子式：C6H13NO3S 

小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Chlorotetracycline  中文名：金霉素  分子式：C22H23ClN2O8
Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  153012-37-4  中文名：  分子式：C28H42N6O8S2    Aigen of human non small cell lung cancer (LTA) ELISA Kit 人非小細(xì)胞抗原(LTA)ELISA試劑盒

Cefcapene pivoxil   147816-24-8  中文名：鹽酸頭孢卡品酯  分子式：C23H32ClN5O9S2    rabbitEsadiol,E2ELISAKit 兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Baclofen  1134-47-0  中文名：巴氯芬  分子式：C10H12ClNO2    CLIAKitforBeta2-GP1AbIgM(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgM)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgM規(guī)格：48T/96T

1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone  58113-30-7  中文名：  分子式：C12H15ClO3    細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)肉湯500毫升

Nifuroxazide  965-52-6  中文名：硝呋酚  分子式：C12H9N3O5    rabbitEndothelin1,ET-1ELISAKit兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞直銷Zolpidem    中文名：坦  分子式：C19H21N3O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠卵泡休止素   英文名稱：   Mouse Follistatin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FST

Zolmitriptan  139264-17-8  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠叉頭框蛋白O3   英文名稱：   Mouse Forkhead Box protein O3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FOXO3

Zileuton  111406-87-2  中文名：齊留通  分子式：C11H12N2O2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脂多糖（LPS）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Xanthorin  17526-15-7  中文名：  分子式：C16H12O6  度：%  關(guān)鍵詞：  抗菌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。