產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0038 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 長鼻袋鼠 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 袋鼠腎細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:PtK1(NBL-3)
種屬:長鼻袋鼠
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0038
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞袋鼠腎細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Methylprednisolone acetate 53-36-1 中文名:甲基潑尼松龍醋酸酯 分子式:C24H32O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠雙鏈DNA 英文名稱: Double sand DNA 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: dsDNA
Methylprednisolone 83-43-2 中文名:甲基潑尼松龍 分子式:C22H30O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠多巴胺 英文名稱: Dopamine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Dopamine
Methyl β-D-fructofuranoside 13403-14-0 中文名:甲基-β-D-果糖苷 分子式:C7H14O6 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠D乳酸 英文名稱: Mouse D Lactic Acid 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: DLA
Methyl levulinate 624-45-3 中文名: 分子式: 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Methyl chlorogenate 29708-87-0 中文名:綠原酸甲酯 分子式:C17H20O9 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠凝血酶受體elisa試劑盒 小鼠凝血酶受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠凝血酶受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠凝血酶受體試劑盒、小鼠凝血酶受體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Fosaprepitant dimeglumine 中文名: 分子式:C30H40F7N6O10P 度:98.0%
小鼠凝血酶受體()ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Fudosteine 13189-98-5 中文名:福多斯坦 分子式:C6H13NO3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠凝血酶受體()ELISAKit ELISA. 96T/48T Formestane 中文名:福美司坦 分子式:C19H26O3 度:98.0%
小鼠凝血酶敏感蛋白-1 英文名稱: thrombospondin 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TSP-1 Folic acid 中文名:葉酸 分子式:C19H19N7O6 度:98.0%
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物elisa試劑盒 小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒、小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Fosaprepitant dimeglumine 中文名: 分子式:C30H40F7N6O10P
Prasugrel 150322-43-3 中文名:普拉格雷 分子式:C20H20FNO3S 豚鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ,英文名: ALB ELISA Kit
Fexofenadine 153439-40-8 中文名:鹽酸非索非那定 分子式:C32H40ClNO4 Human hepatocellular carcinoma aigen (PHC) ELISA Kit 人抗原(PHC)ELISA試劑盒
Adefovir 106941-25-7 中文名:阿德福韋 分子式:C8H12N5O4P rabbitiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
trans-4-Aminocyclohexanol 27489-62-9 中文名: 分子式:C6H13NO CLIAKitforATG(Humanai-thymocyteglobulin)ELISAKit人抗胸腺細(xì)胞球蛋白規(guī)格:48T/96T
Cyproheptadine 969-33-5 中文名:鹽酸賽庚啶 分子式:C21H22ClN 線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次
袋鼠腎細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Zolmitriptan 中文名:佐米曲普坦 分子式:C16H21N3O2 度:98.0% 鱸魚皮質(zhì)醇 英文名稱: Coisol 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CO
Olopatadine 中文名:鹽酸奧洛他定 分子式:C21H24ClNO3 度:98.0% 鱸魚溶菌酶/胞壁質(zhì)酶 英文名稱: Lysozyme /Muramidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Lysozyme
Tenofovir 中文名:泰諾福韋 分子式:C9H14N5O4P 度:98.0% 細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
Naftopidil di 中文名:鹽酸萘哌地爾 分子式:C24H30Cl2N2O3 度:98.0% 細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒 48T
Zileuton 中文名:齊留通 分子式:C11H12N2O2S 度:98.0% 偽毒(PRV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。