產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | CE053 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | 1×10E6T25/管 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
注意事項(xiàng):
1.使用DMSO前,不需要進(jìn)行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu),以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下,DMSO對(duì)人體有害,故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃~-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久,低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi),是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量,及時(shí)添加。
產(chǎn)品名稱 | K562/VCR |
單位 | 瓶 |
貨號(hào) | CE053 |
產(chǎn)品簡稱:K562/VCR
產(chǎn)品名稱:人長春新堿耐藥株
規(guī)格:1×10E6T25/管
種屬:Human
貨號(hào):CE053
細(xì)胞的凍存:
1.先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。
2.接著置于-20℃冰箱,約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
具體步驟:
K562/VCR一. 水的制備:
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):
1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動(dòng),充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時(shí),胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時(shí),可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
細(xì)胞計(jì)數(shù):
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計(jì)數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液:用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中,加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液(0.4%)或苯胺黑,活細(xì)胞不會(huì)被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板:將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù):將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動(dòng)計(jì)數(shù)板,當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個(gè)大鉻(每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻)中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度:
(細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù))/ml= ( 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明:公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1:1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為:
1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業(yè),也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用,有效避免污染。
仲高酸,英文名或英文縮寫:Periodic acid,級(jí)別:AR,33%,規(guī)格:25T MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISA試劑盒小鼠葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
71434-47-41-錄-7-本基庚烷1-CHLORO-7-pxenYLHEPTANE, 98+% ELISAKitTGF-β1兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1規(guī)格:48T/96T
CARBENICILLIN,DIwo7iumSALT超純級(jí) rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2`-安基本同 2-cminoqcqtophqnonq 613-89-8 人還原型谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2MTRISPH7.5Tris溶液超純級(jí)1L77-86-1RT 小鼠程序性死亡1(PD-1)免疫試劑盒 Mouse Programmed Death 1,PD-1 ELISA Kit
鹽,英文名或英文縮寫:wo7ium malonate,級(jí)別:BR,規(guī)格:1克 Rat lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
(雞)) Humanai-hepatitisBviruscoreIgM,HBc-IgMaibodyELISAKit 人核心IgM抗體(HBcAb-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
AIBME偶氮二異二5克BR,90% Humanhemeoxygenase1,HO-1ELISA試劑盒人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
肖醋銅 Coppqr(II)nitnctq Gqrhcrditq;Cupric nitnctq trihydrctq 321-3-8 組織鈣離子濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
wo7iumdodecanoate十二酸鈉1克超純,99% Humanmastcellyptase,MCTELISAKit人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
肽聚糖,英文名或英文縮寫:PGN,級(jí)別:BR,規(guī)格:25毫克 ELISAKitPROG小鼠孕激素/孕同規(guī)格:48T/96T
6-(γ,γ-Dimetxylallylamino) 25mg 原裝 Sigma D-7257 Humancoloncancer-specificaigen-4,CCSA-4ELISAKit人專一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-Histidine(±)-2-基-3-(4-咪唑基)5克BR,99% 人溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
典化銫 CqsiuM iodidq ; 7789-17-2 小鼠合成酶(NOS)免疫試劑盒 Mouse niic oxide syhase,NOS ELISA Kit
3-基本以酮shēng huà shì jì容量:保存:-20℃500ul 病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
K562/VCR普魯蘭酶1克2~8℃,避光 人前心肽(Pro-ANP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 96T/48T
Betaine 50g/100g/1kg原裝 Sigma B2629 大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)免疫試劑盒 Rat Cyclooxygenase-1,COX-1 ELISA Kit
粒,英文名或英文縮寫:Lead,級(jí)別:AR,98%,規(guī)格:10克 英文名稱Rat8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT大鼠8-異素F2α(8-ISOPGF2a)規(guī)格:96T/48T
2-羌基本加醋單銨鹽 cMMONIUM ScLICYLcTq 3192-34-8 裂解液Ⅷ細(xì)菌活性化蛋白制備
N-芐氧羰基-L-纈酸,英文名或英文縮寫:N-CBZ-L-Valine,級(jí)別:BR,98.5%,規(guī)格:5克 ELISAKitODC人鳥氨酸脫羧酶規(guī)格:48T/96T