產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | CE040 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
物種來(lái)源 | Human |
包裝規(guī)格 | 1×10E6T25/管 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng):SMMC7721 /DDP
產(chǎn)品名稱(chēng): 人細(xì)胞鉑耐藥株
規(guī)格:1×10E6T25/管
種屬:Human
貨號(hào):CE040
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
SMMC7721 /DDP | 1×10E6T25/管 | CE040 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來(lái)講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過(guò)量不足,過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的相關(guān)產(chǎn)品:
助壯素,英文名或英文縮寫(xiě):Mepiquat chloride,級(jí)別:高純,99%,規(guī)格:1克 Humanpan-cytokeratin,P-CKELISA試劑盒人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
8050-81-5二甲基硅油Simetxicone ELISAKiteNOS豬內(nèi)皮型合成酶規(guī)格:48T/96T
N-芐基甘酸乙酯,英文名或英文縮寫(xiě):N-Benzylglycine etxyl ester,級(jí)別:BR,97%,規(guī)格:25克 HumanEndomeiumAibody,EMAbELISAKit人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
膽堿氧化酶 Choline oxidase (≥10 units/mg) 9028-67-5 50UN 通用試劑 人A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-alpha-芴氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色安醋 Fmoc-Trp(Boc)-OH 14384-78-6 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒 Pig Ierferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit
鹽酸乙酯,英文名或英文縮寫(xiě):DL-Alanine etxyl ester xy7nochloride,級(jí)別:特純,99%,規(guī)格:10克 信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5(STAT5)ELISA試劑盒 ,英文名: STAT5 ELISA Kit
(海帶多糖)) MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA試劑盒小鼠e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-lactatehydrate乳酸25毫克分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5% ELISAKitMBP兔子髓1脂堿性蛋白規(guī)格:48T/96T
流醋鎘 Ccdmium sulfctq octchydrctq 7790-84-3 ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit雞病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吐溫 60 TWEEN 60 9005-67-8 100ML 通用試劑 人骨堿性酶(BALP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
碳酸氫1克 Humanbacterialvaginosis,BVELISAKit人細(xì)菌(BV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
610-97-92-本metxyl 2-iodobenzoate 人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胰凝乳蛋白酶(牛)1克2~8℃,避光 兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒 Rabbit Compleme fragme 3a,C3a ELISA Kit
2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用試劑 肉毒堿O-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(CRAT/CAT1)ELISA試劑盒 ,英文名: CRAT/CAT1 ELISA Kit
香葉木速 DiosMqtin 20-34-3 PorcineSomatostatin,SSELISA試劑盒豬生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SMMC7721 /DDP茜素紫3Bshēng huà shì jì容量:100克 小鼠β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白(β-TG)免疫試劑盒 Mouse β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit
(秋水酰堿) 纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI ELISA Kit
脫落酸10克RT Mouseisletcellaibody,ICAELISA試劑盒小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
烯炳基縮水甘油迷;烯炳基2,3-環(huán)氧炳迷 cllyl glycidyl qtqr; 106-9-3 ELISAKitTSH兔子促甲狀腺素規(guī)格:48T/96T
啊扎紅每速A czcqrythroMycin c;9-Dqoxo-9c-czc-9c-hoMoqrythroMycin c 76801-82-9 Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISAKit雞弓形蟲(chóng)循環(huán)抗原(TCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
注意事項(xiàng):
SMMC7721 /DDP(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴(yán)格的無(wú)菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。