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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：NCI-H82細(xì)胞
中文名稱：人小細(xì)胞株細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：小細(xì)胞；轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：半貼壁

單位:

貨號(hào)：E0661

帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用，有效避免污染。

細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項(xiàng)：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。

具體步驟：
NCI-H82細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。

細(xì)胞計(jì)數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計(jì)數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會(huì)被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板：將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動(dòng)計(jì)數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個(gè)大鉻（每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻）中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：
1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

mouse Activin A   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   原裝進(jìn)口     Otophylloside F  250217-73-3  中文名：青陽參苷F  分子式：C48H76O16 

MiniELGelExactionKit   100T  Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  1449-61-2  中文名：7-酮基去氫表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4 

MiniEleDNAKit   100T                 Androst-2-en-17-one  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O 

M13噬菌體單鏈基因組DNA快速提取試劑盒   Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA  Panaxyne  中文名：  分子式：C14H20O2 

L-異亮酸   10g  Vildagliptin  274901-16-5  中文名：維達(dá)列汀  分子式：C17H25N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
鹽酸左西替利嗪  Levoceitrizine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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鹽酸雷莫司瓊（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ramosetron  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 ，英文名： GIP ELISA Kit

*度酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Etodolac  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GL2)ELISA試劑盒 ，英文名： GL2 ELISA Kit

（標(biāo)準(zhǔn)品）  Amfebutamone 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GL4)ELISA試劑盒 ，英文名： GL4 ELISA Kit

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Withaperuvin C  中文名：  分子式：C28H38O7  度：96.5%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MMP-1

Otophylloside O  中文名：  分子式：C56H84O20  度：96.5%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MMP-2

Qingyangshengenin 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H84O20  度：92.0%  兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit  

Otophylloside F  中文名：青陽參苷F  分子式：C48H76O16  度：95.0%  兔(NO)ELISAKit  

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Gliquidone  33342-05-1  中文名：格列喹酮  分子式：C27H33N3O6S    rabbitEndostatin,ESELISAKit兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Lansoprazole  103577-45-3  中文名：蘭索拉唑  分子式：C16H14F3N3O2S    豚鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 ，英文名： CRP ELISA Kit

Gliclazide  21187-98-4  中文名：格列齊特  分子式：C15H21N3O3S    Human hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 人肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒

Carvedilol  72956-09-3  中文名：卡維地洛  分子式：C24H26N2O4    rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝