產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E01282 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 食管鱗癌;男性 |
細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:T BK10細胞
中文名稱:人細胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:食管鱗癌;男性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號:E01282
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
T BK10細胞 | 瓶 | E01282 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
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甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白拼接同種型3(104-173),人 pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱RatCA125ELISAKit大鼠標志物(CA125)規(guī)格:96T/48T
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甲狀旁腺激素(3-34),牛 pTH (3-34) (bovine) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitHEV-IgM人病毒IgM規(guī)格:48T/96T
S-I-G-S-L-A-K S-I-G-S-L-A-K 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠肥大/干細胞生長因子受體(Kit/Sl/CD117)ELISA試劑盒 ,英文名: Kit/Sl/CD117 ELISA Kit
SAMs肽 SAMs Peptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠B細胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA檢測試劑盒RatB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 96T/48T
猿猴病毒40大抗原氨基段肽段 Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人白介素1受體樣1(IL1RL1)試劑盒 Human IL1RL1 ELISA Kit
生長抑制素-28 Somatostatin-28 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡELISAKIT小鼠可溶性受體Ⅱ(TNFsRⅡ)規(guī)格:96T/48T
物質(zhì)P(1-7) Substance P (1-7) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR pFASTBAC+目的基因SF9昆蟲表達
S-180(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細胞裂解液 (陽性對照) 白藜蘆醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品Resveratrol
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KM9801瑞替加濱堿質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%Retigabine Base
CHODL Others Mouse 小鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99%(GC)Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane
H1299 人雷替曲塞質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Raltitrexed
RKO-AS45-1人轉(zhuǎn)基因細胞 Human colon cancer RKO-AS45-1 ansgenic cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSL-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%L-Ornithine L-aspartate salt
T BK10細胞CD226 Others Rat 大鼠 CD226 / DNAM-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 百里香酚酞質(zhì)量規(guī)格:AR;INDThymolphthalein
大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc釷試劑質(zhì)量規(guī)格:0.9Thorin
JEG細胞,人 大鼠肝細胞,IAR20細胞 人成纖維細胞-心房HCF-aa美洛昔康(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Meloxicam
HuTu-80(人十二脂腸腺癌) 5×106cells/瓶×2鹽酸美金剛胺質(zhì)量規(guī)格:>99%Memantine HCl
769-P(人腎細胞腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H083人臍動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL 人間充質(zhì)干細胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg鹽酸美金剛(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Memantine hydrochloride
注意事項:
T BK10細胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴格的無菌操作;
(6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。