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產(chǎn)品簡稱：HRIF細(xì)胞
中文名稱：人腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：腎；間質(zhì)成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01559

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

dPMix,10mMeach(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)   100x0.5ml                 Amoxapine  中文名：阿莫沙平  分子式：C17H16ClN3O 

DPD余測定試劑盒   DPD residual  test kit                 4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl  中文名：  分子式：C16H18FN3O3S 

DPD臭氧測定試劑盒   DPD ozone reage kit  4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  519-98-2  中文名：  分子式：C12H15N3O 

DNaseI,frombovinepancreas  Amoxicillin  26787-78-0  中文名：阿莫西林  分子式：C16H19N3O5S 

DL-DTE                    3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one  中文名：3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮  分子式：C9H9N3O
香荊芥酚（標(biāo)準(zhǔn)品）  5-Isopropyl-2-methylphenol  質(zhì)量規(guī)格：供含量測定用 英文名稱Mouset-PAELISAKit小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格：96T/48T

十七碳酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  METHYL HEPTADECANOATE  質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標(biāo) pBADCE4.1+目的基因雙基因真核表達(dá)

鴨腳樹葉堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISA試劑盒豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

6-羥基-7-甲氧基香豆素（標(biāo)準(zhǔn)品）  6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠鈣網(wǎng)蛋白(C)ELISA試劑盒 ，英文名： C ELISA Kit

苦玄參苷IA（標(biāo)準(zhǔn)品）  PIEFELTARRAENIN A  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA檢測試劑盒HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 96T/48T

番茄堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Tomatidine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠三甲腺原氨酸(T3)抗體試劑盒 Rat i-iodothyronine(T3)aibody ELISA kit

左旋樟腦（標(biāo)準(zhǔn)品）  (-)-CAMPHOR  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 英文名稱RatTATELISAKit大鼠凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物(TAT)規(guī)格：96T/48T

11-羰基-β-乙酰乳香酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  3-ACETYL-11-KETO-BETA-BOSWELLIC ACID  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 活體組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級綠色熒光測定試劑盒40/100

3',4',5',5,7-五甲氧基黃酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  3',4',5',5,7-PENTAMETHOXYFLAVONE  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 ELISAKitCYP21B人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶規(guī)格：48T/96T

金橙II（標(biāo)準(zhǔn)品）  OrangeΙΙ  質(zhì)量規(guī)格：檢查 小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒 ，英文名： CCB ELISA Kit
小鼠細(xì)胞;CT26.WT [CT26WT] 小鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鋁試劑質(zhì)量規(guī)格：ACSAluminon

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Rattus酸性鉻藍(lán)K質(zhì)量規(guī)格：指示劑級Acid chrome blue K

ACVR1B Others Human 人 ALK4 / ACVR1B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 富馬酸喹硫平質(zhì)量規(guī)格：>99%Quetiapine Fumarate

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0919富馬酸喹硫平（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Quetiapine Fumarate

SIAE Others Human 人 sialate O-acetylesterase / SIAE 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雷特格韋鉀質(zhì)量規(guī)格：含量>98.5%,BRRaltegravir K
HRIF細(xì)胞CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸磺胺米隆Mafenide Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人結(jié)膜成纖維細(xì)胞cDNAHConF cDNA硼替佐米中間體IBortezomib intermediates I質(zhì)量規(guī)格：>97%

IL6ST Others Rat 大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 保特佐米蒎烷二醇酯BortezoMib Pinanediol Ester質(zhì)量規(guī)格：>97%

293 人胚腎細(xì)胞甲磺司特Suplatast tosilate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CL-0281HELF(人胚)5×106cells/瓶×21丙基-α-D-吡喃半乳糖苷Allyl α-D-galactopyranoside質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
注意事項(xiàng)：
HRIF細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。