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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng)：NCI-H69細(xì)胞
中文名稱(chēng)：人小細(xì)胞細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來(lái)源：小細(xì)胞；轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：半貼壁

單位:

貨號(hào)：E0859

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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Alpha生育三烯酚 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin1,IL-1ELISAKit大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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三七皂苷T HPLC≥95% 20mg RatIerleukin10,IL-10ELISAKit大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

帕克醇 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin10,IL-10ELISA試劑盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

沒(méi)食子酰基奎寧酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin11,IL-11ELISAKit大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

沒(méi)食子?；鼘幩?/span> HPLC≥95% 20mg RatIerleukin11,IL-11ELISA試劑盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去氧蘇木查耳酮 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

過(guò)氧去氫土莫酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P40ELISA試劑盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去氫土莫酸 HPLC≥95% 20mg RatIerleukin12,IL-12/P70ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Vilazodone hydrochloride  163521-08-2  中文名：鹽酸維拉唑酮  分子式：C26H28ClN5O2    人軸突生長(zhǎng)誘向因子1(n1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human n1 (Nein 1) ELISA Kit

2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  24522-30-3  中文名：  分子式：C10H7F3N2O    人軸突生長(zhǎng)誘向因子4(n4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human n4 (Nein 4) ELISA Kit              

Teriflunomide  163451-81-8  中文名：特立氟胺  分子式：C12H9F3N2O2    人周期素依賴(lài)性激酶7(CDK-7)ELISAKit  

3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  85175-59-3  中文名：  分子式：C15H18ClNO3    人周期素依賴(lài)性激酶2(CDK-2)ELISAKit  

7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  73942-87-7  中文名：  分子式：C12H13NO3    人周期素依賴(lài)性激酶1(CDK-1)ELISAKit
NCI-H69細(xì)胞3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  766-36-9  中文名：  分子式：C7H11NO    兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Ranolazine  95635-55-5  中文名：雷諾嗪  分子式：C24H33N3O4    Rat vascular endothelial cell growth factor B (VEGF-B) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒

Telmisartan  144701-48-4  中文名：替米沙坦  分子式：C33H30N4O2    HumanCathepsinAibodies,CathAbELISAKit 人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

((2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide  154057-58-6  中文名：  分子式：C37H30BrFNP    Humancysteinylleukoienes,CysLTsELISA試劑盒人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  147619-40-7  中文名：  分子式：C7H5ClN2O2    組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次
注意事項(xiàng)：
NCI-H69細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。