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帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用，有效避免污染。

產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：KYSE150細(xì)胞
中文名稱：人食管鱗癌細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來(lái)源：食管鱗癌；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E0875

細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。
4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項(xiàng)：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過(guò)久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。

具體步驟：
KYSE150細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過(guò)夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
Rifampicin  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12    植物血凝素   5mg

Ribavirin  中文名：利巴韋林  分子式：C8H12N4O5    Lectin,fromArachisHypogaea(pean)

Rhein  中文名：大黃酸  分子式：C15H8O6    植物血凝素   5mg

Retigabine  中文名：瑞替加濱  分子式：C16H18FN3O2    Lectin,fromiticumvulgaris                 

Repaglinide ethyl ester  中文名：  分子式：C29H40N2O4    植物血凝素（PHA）ELISAKit
1,3,5-三(甲基)苯(>98.0%(GC))  1,3,5-Tris(bromomethyl)benzene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) PorcineansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISA試劑盒豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

并四苯(>98.0%(HPLC))  Naphthacene  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC) 小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒

并四苯 (升華提)  Naphthacene (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) Rat endothelial lipase (EL) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒

并五苯(以升華法化)  Pentacene (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格： Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISAKit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

顏料藍(lán) 15(以升華法化)  Pigment Blue 15 (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) HumanAquaporin0,AQP-0ELISA試劑盒人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酞菁(以升華法化)  Phthalocyanine (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N) 植物乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

苉(升華提)  Picene (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC) Humaissueinhibitorofmetalprotease1，TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5,6,11,12-四苯基并四苯(升華提)  5,6,11,12-Tetraphenylnaphthacene (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) 小鼠兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)ELISA試劑盒 ，英文名： COMT ELISA Kit

1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-十六氟酞菁銅(II)(以升華法化)  1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-Hexadecafluorophthalocyanine Copper(II) (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)(T) 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白(MEPE)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmaixexacellularphosphoglycoprotein,MEPEELISAKit 96T/48T

3,4,9,10-苝四羧酸二酐(>98.0%(T))  3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Dianhydride  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 大鼠素E代謝物(PGEM)試劑盒 Rat Prostaglandin E Metabolite,PGEM ELISA Kit
PPT1 Others Human 人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸川芎嗪質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRLigustrazine HCl

人葡萄膜色素細(xì)胞;UM頭孢氨芐質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,一水合物Cephalexin

犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞，Mo-MuLv/3T3細(xì)胞 LA795細(xì)胞，小鼠系肉豆蔻(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品Myristicin

人胚;MRC-5卡枯醇質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Kakuol

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-細(xì)辛脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品L-Asarinin
KYSE150細(xì)胞C6, 大鼠腦細(xì)胞 導(dǎo)管癌細(xì)胞,ZR-75-1細(xì)胞 J-1111(單核細(xì)胞)糊精肽，人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRAmylin,human

小鼠瘤細(xì)胞;EL4緊張素A質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRAngiotensin A

REN Others Mouse 小鼠 REN1 / Renin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRAngiotensin ConvertingEnzyme Inhibitor

6-10B, 人細(xì)胞系緊張素原（1-14），大鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRAngiotensinogen (1-14) ,Rat

MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 亞油酸膽酯(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)Cholesterol Linoleate
細(xì)胞計(jì)數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計(jì)數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會(huì)被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板：將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑小?/span>
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動(dòng)計(jì)數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個(gè)大鉻（每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻）中沒(méi)有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說(shuō)明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：
1.0mm（長(zhǎng)）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3