產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7267 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:黃桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Tenacibaculum spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
黃桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人胚;WI-38 [WI38]對磺酸1克RT
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) -β-環(huán)糊精 2-Hydroxyethyl)-β-Cyclodextrin,≥99.0% 128446-32-2 25G 通用試劑
狗骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells肌苷;皇嘌呤核苷;9-β-D-核糖基皇嘌呤 Inosinq;Hypoxcnthosinq;9-β-D-Ribofurcnosylhypoxcnthinq;OxicMinq;Ribonosinq;Trophiccrdyl 28-63-9
HME7細(xì)胞,人色素瘤細(xì)胞 短雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;HH-29氧化發(fā)酵試驗(yàn)(OF)培養(yǎng)基25克
UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞癌) 5×106cells/瓶×2666-52-4氘代-D6eetonE-D6
大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1腺苷 2':3'-環(huán)單1酸鹽鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Adenosine 2':3'-cyclic monophosphate salt
IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) P1,P5-Di(腺苷-5'-)五1酸鹽,三鋰鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口P1,P5-Di(adenosine-5’-)pentaphosphate, Trilithium Salt
主動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)腺苷5‘-O-(-2-硫代三1酸)三鋰鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Adenosine 5′-O-(2-Thiodiphosphate), Trilithium Salt
MST1R Others Human 人 MST1R / CD136 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-甲基硫代二1酸腺苷質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口2-Methylthio-ADP 3 salt
L-O2 人正常胎肝細(xì)胞腺苷 5'-1酰硫酸 鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Adenosine 5'-phosphosulfate salt
貓腎細(xì)胞;CRFK 人胚腎細(xì)胞,293[HEK-293]細(xì)胞 Fox-NY細(xì)胞,小鼠細(xì)胞鹽酸林可霉素shēng huà shì jì容量:100克
人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]2-嗎啉基乙基異 2-Morpholinoethyl isocyanide,≥98.0% 78375-48-1 10ML 通用試劑
SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / SemaF / Semaphorin-5A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-1醋二酯 L(+)-Diqthyl L-tcrtrctq 87-91-
腸內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)結(jié)晶碳酸鈉shēng huà shì jì容量:25克
FCGRT & B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 50-32-83,4-本并芘3,4-Benzopyrene
黃桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml25-O-去乙?;2纪?/span>25-O-Deacetyl Rifabutin質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/chicken/ Yamaguchi/7/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) HDAC靶點(diǎn)抑制劑CUDC-101質(zhì)量規(guī)格:>98%
615小鼠T細(xì)胞性瘤株;L7912鹽酸洛美利嗪Lomerizine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17 腹水瘤細(xì)胞,SAC-IIC3細(xì)胞 EMT6細(xì)胞,小鼠細(xì)胞酯蟾毒配基;蟾力蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)Resibufogenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人上皮細(xì)胞;MCF-10A蒲公英甾醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Taraxasterol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品