產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7255 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說(shuō)明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Syngamus trachea
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2泛影酸鈉(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC diatrizoate dihydrate
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氟鋁酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR fluoroaluminate
兔腎細(xì)胞;RK-13馬尿酸鈉(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR hippurate
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鈉(>95%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR laurate
Ishikawa 人細(xì)胞吡嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Pyrazine
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO C1008 (E6) 中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞,V79細(xì)胞 HCCC-9810(膽管細(xì)胞型細(xì)胞)分子篩, 5 ?(干燥劑用)質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用Molecular sieves, 5 ?
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1008分子篩, 5 ?(pellets,3-5 mm)質(zhì)量規(guī)格:pellets,3-5 mmMolecular sieves, 5 ?
CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 格列齊特質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGliclazide
CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL格列齊特(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品Gliclazide
CDH18 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 格列本脲質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRGlyburide/Gliebenclamide
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1) 細(xì)胞,SHG-44細(xì)胞 W6/32細(xì)胞,小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞P-DImetxYLAMINOCINNAMALDEHYDE對(duì)二甲基肉桂醛*橙棕色粉末FRZsigma
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞 Mouse苯芴酮 Phenylfluorone,978 975-17-7 25G 通用試劑
CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 格拉司瓊相關(guān)物質(zhì)B Grcnisqtron Rqlctqd CoMpound B;N-[(1R,3r,5S)-9-Mqthyl-9-czcbicyclo[3.3.1]non-3-yl]-1H-indczolq-3-ccrboxcMidq 107007-92-4
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2FM-2-prfGly-Vlu甘酰-L-纈酸1克BR,98%
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 112-34-5二乙二醇一丁;二乙二醇丁;二羥二;丁基卡別妥爾;二甘醇一丁;2-(2-丁氧基乙氧基)乙醇;二乙二醇單丁Dietxylene glycol Monobutyl ;Butyl digol;Butyl diicinol;2-(2-Butoxyethoxy)ethanol
氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒青霉素/鏈霉素溶液P/SL-脯氨酰胺L-Prolinamide質(zhì)量規(guī)格:0.98
VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-谷氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格:>99%(TLC),標(biāo)準(zhǔn)品
人急性T細(xì)胞細(xì)胞;Jurkat, Clone E6-1L-谷氨酸(sigma)L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,Sigma分裝
H7402細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞,EAC細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76DL-谷氨酸DL-Glutamic acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物
MGC80-3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2肌氨酸Sarcosine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。