產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7251 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Subulura brumpti
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
人胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293D-谷酰胺10克RT
ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用試劑
HCC827 人非小細(xì)胞細(xì)胞拂化 litxium fluoridq 7789/4/4
2V6.11人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS輔酶A10克RT
TNF Protein Ferret 重組雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白PH緩沖液 PH5.0(20℃)NA
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2N-(1,3,4-Thiadiazolyl)煙酰胺質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口N-(1,3,4-Thiadiazolyl)nicotinamide
FN1 Others Human 人 Fibronectin / Fibronectin Fragme 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) β-煙酰胺單核苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口β-Nicotinamide mononucleotide
615小鼠T細(xì)胞性瘤株;L7712環(huán)丙孕酮質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Cyproterone
MAP2K6 Others Human 人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 (207 Ser/Asp, 211 Thr/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 15β-羥基醋酸環(huán)丙孕酮質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口15β-Hydroxy Cyproterone Acetate
CM-M017小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL咽側(cè)體抑制素Ⅳ質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAllatostatin IV
HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ZincAcetateDihydrate醋酸鋅二水美國(guó)藥典級(jí)白色精細(xì)粉末RTsigma
人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1暈苯 Coronene,97% 191-07-1 100MG 通用試劑
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK 腺癌細(xì)胞,COLO-320細(xì)胞 ST細(xì)胞,豬細(xì)胞系(ST)務(wù)二臘酐 Glutcric cnhydridq 108-22-4
Ca Ski, 人細(xì)胞 HumanDigitonin洋地黃皂苷5克BR,95%
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 佛手油NA
布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)DL-半胱氨酸DL-Cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,易氧化
小鼠神經(jīng)質(zhì)細(xì)胞(MN-sn)(1×106) T24, 人細(xì)胞 HumanL-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽L-Glutamine t-butyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.98
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)L-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽L-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-芐基甘氨酸鹽酸鹽Bzl-Gly-OH·HCl質(zhì)量規(guī)格:0.98
皮膚肥大細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)甘氨酸芐酯鹽酸鹽Glycine benzyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.98
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。