產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7246 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
馬類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:馬類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Strongyloides equinus
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFP亞鈷鈉shēng huà shì jì容量:500克
PVRL3 Others Human 人 PVRL3 / CD113 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 溴代仲丁烷 2-Bromobutcnq 78-76-
人內(nèi)根殼細(xì)胞裂解物HHIRSCL四氫硼鉀,英文名或英文縮寫:potewwium borohydride,級(jí)別:AR,97%,規(guī)格:100毫克
CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 微晶纖維素shēng huà shì jì容量:100克
人腦微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL59-48-52,4-二硝基酚(劇毒)(易)2,4-pxenol
肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸阿扎司瓊-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Azasetron-d3, Hydrochloride
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶 小鼠骨骼肌肌肉母瘤細(xì)胞,G-7細(xì)胞 P815(肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞)Y-25130 鹽酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Y-25130 Hydrochloride
人細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]去甲基尼扎替丁質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Desmethyl Nizatidine
IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 慶大霉素C1a質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Gentamicin C1a
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO脫氟帕羅西汀鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Defluoro Paroxetine, Hydrochloride
大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2檸檬酸氫二1克
CLEC1B Others Human 人 CLEC1B / CLEC2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-羥脯酸鹽酸鹽 L-4-Hydroxyproline methyl ester hydroc... 40216-83-9 5G 通用試劑
HS683 人腦細(xì)胞己醋異務(wù)酯;羊油醋異務(wù)酯 IsocMyl ccproctq;γ-Mqthylbutyl hqxcnoctq;Ccproic ccid isopqntyl qstqr;Isopqntyl ccproctq;IsocMyl hqxcnoctq 198-61-0
SW 780 [SW-780, SW780]人膀胱移行細(xì)胞癌 SW 780 [SW-780, SW780] in human bladder ansitional cell carcinoma L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS100克
VEGFA Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白103-11-7酸2-乙基己酯;酸辛酯;敗脂酸辛酯2-etxylhexyl acrylate;Acrylic acid 2-etxylhexyl ester
馬類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒A673細(xì)胞,人橫紋癌細(xì)胞 鏈球菌 615小鼠狀肺腺株;P615水楊酸(AR)Salicylic acid質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)L-1酸L-Tartaric acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
MA-782(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二甲基脲N,N'-Dimethylurea質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)氧化鎳Nickel(II) oxide green質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
THBD Others Rat 大鼠 Thrombomodulin / THBD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 吩嗪Phenazine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。