進(jìn)一步探索小鼠腹水瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性
發(fā)表時(shí)間:2024-09-09
小鼠腹水瘤細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。*天換液并檢查細(xì)胞密度。次日清晨,實(shí)驗(yàn)室里彌漫著淡淡的培養(yǎng)基香氣,輕輕揭開(kāi)培養(yǎng)瓶的蓋子,只見(jiàn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)良好,形態(tài)飽滿,呈現(xiàn)出健康的綠色光澤。我小心翼翼地吸去舊培養(yǎng)基,以避免對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械損傷,隨后緩緩加入新鮮預(yù)熱至37℃的5mL培養(yǎng)基。這一步驟不僅為細(xì)胞提供了必要的營(yíng)養(yǎng),還幫助去除了代謝廢物,促進(jìn)了細(xì)胞的進(jìn)一步生長(zhǎng)與分裂。
接下來(lái),利用顯微鏡進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),通過(guò)血球計(jì)數(shù)板估算出當(dāng)前的細(xì)胞密度,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整培養(yǎng)條件。觀察到細(xì)胞密度適中,無(wú)明顯污染跡象,我松了一口氣,這意味著復(fù)蘇過(guò)程非常成功。
隨后,我記錄下詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)筆記,包括細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)間、培養(yǎng)基類型、換液時(shí)間、細(xì)胞密度等信息,這對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的連續(xù)性和可重復(fù)性至關(guān)重要。
為了進(jìn)一步探索小鼠腹水瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性,計(jì)劃進(jìn)行一系列的功能實(shí)驗(yàn),如藥物敏感性測(cè)試、增殖曲線繪制及基因表達(dá)分析等。這些實(shí)驗(yàn)將為理解腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)機(jī)制、尋找潛在的治療靶點(diǎn)提供寶貴的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
隨著實(shí)驗(yàn)計(jì)劃的逐步推進(jìn),我深知每一步都需嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致,因?yàn)槊恳粋€(gè)小小的發(fā)現(xiàn)都可能為癌癥治療領(lǐng)域帶來(lái)新的突破。帶著這份責(zé)任與期待,我再次投身于繁忙而充實(shí)的實(shí)驗(yàn)工作中。