人Dectin-1蛋白ELISA試劑盒操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
改良CCD瓊脂配套試劑
規(guī)格:
10支/盒
作用:
每支添加于100ml(022212)中配成MLST
Bolton肉湯配套試劑
規(guī)格:
10支/盒
作用:
每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎(chǔ)中
水解酪蛋白胨(MH)瓊脂
規(guī)格:
250g
作用:
滅菌后冷卻至45℃左右時加入5%的脫纖維羊血,配成Mueller Hinton 血平板,用于空腸彎曲菌的藥敏試...
布氏肉湯
規(guī)格:
250g
作用:
用于空腸彎曲菌培養(yǎng)及運(yùn)動性觀察。(GB、ISO)
Skirrow瓊脂
規(guī)格:
250g
作用:
用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加2支配套試劑。(SR0330)
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)
規(guī)格:
250g
作用:
用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑
Bolton肉湯基礎(chǔ)
規(guī)格:
250g
作用:
用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑(SR0340)
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基
規(guī)格:
250g
作用:
滅菌后冷至45℃左右時加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養(yǎng)。(CP、GB、EP、USP)
Skirrow瓊脂配套試劑
規(guī)格:
10支/盒
作用:
每支添加于100mL的 Skirrow瓊脂基礎(chǔ)中
改良CCD瓊脂配套試劑
規(guī)格:
10支/盒
作用:
每支添加于100ml(022212)中配成MLST
Bolton肉湯配套試劑
規(guī)格:
10支/盒
作用:
每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎(chǔ)中
水解酪蛋白胨(MH)瓊脂
規(guī)格:
250g
作用:
滅菌后冷卻至45℃左右時加入5%的脫纖維羊血,配成Mueller Hinton 血平板,用于空腸彎曲菌的藥敏試...
布氏肉湯
規(guī)格:
250g
作用:
用于空腸彎曲菌培養(yǎng)及運(yùn)動性觀察。(GB、ISO)
Skirrow瓊脂
規(guī)格:
250g
作用:
用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加2支配套試劑。(SR0330)
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)
規(guī)格:
250g
作用:
用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑
Bolton肉湯基礎(chǔ)
規(guī)格:
250g
作用:
用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑(SR0340)
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基
規(guī)格:
250g
作用:
滅菌后冷至45℃左右時加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養(yǎng)。(CP、GB、EP、USP)