F-BL21（DE3） 感受態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
胎兒表皮角化細(xì)胞完全培養(yǎng)基
新生兒表皮角化細(xì)胞完全培養(yǎng)基
成人表皮角化細(xì)胞完全培養(yǎng)基
胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基
成人真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人表皮黑色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人破骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人成骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人前脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人腦膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基