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細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體實(shí)驗(yàn)原理

發(fā)表時(shí)間:2021-09-16
細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體實(shí)驗(yàn)原理:
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е?。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過及粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。

(6)抗體對理化因子的與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。

抗原準(zhǔn)備:
經(jīng)常使用的抗原有:偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言,為了增強(qiáng)其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類型、節(jié)約抗原等目的,通常采用加佐劑的方法以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區(qū)別:
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原(大分子抗原、半抗原偶聯(lián)物)刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng),有機(jī)體漿細(xì)胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價(jià)測定:采用瓊脂擴(kuò)散法。
⑴ 將血清倍比稀釋,加入外周孔。
⑵ 中間孔加動(dòng)物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴(kuò)24 小時(shí)后觀察結(jié)果。

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